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组培瓶

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组培实验报告

发布时间:2019-09-03 05:16 浏览次数:

  组培实验报告_理学_高等教育_教育专区。组培实验室的设计及实验仪器设备的使用

  专业班级:生物技术 2 班 学号: 姓名:蒋薇 同组人:卢晓 燕、王雪娇、杨佳梅、袁蓉、莽斌、林兴龙、刘显浩、关德红、李玉胜 试验日期:2014 年 3 月 10 日 试验序号:1 室温: 大气压: 试验名称:组培室的设计及实验仪器设备的使用 一、 实验目的 1.了解普通植物组织培养实验室和工厂育苗植物组织培养室的差别; 2.掌握植物组织培养实验室的•●组成及各分室的功能; 3.学会分析各种类型植物组织培养实验室的优点和缺点; 4.学会常见植物组织培养设备的使用方法。 二、 试验原理 1.物组织培养实验室是完成植物组织培养的重要场所, 植物组织培养 实验室设计合理与否植影响着植物组织培养的成败。 2.植物组织培养实验室有:准备室、接种室、培养室、温室。 ①准备室: 在准备室主要进行一◆●△▼●些常规实验操作,如各种药品的储备,称量, 器皿洗涤,培养基配制,培养基和培养器皿的灭菌,培养材料的预处 理等。为了方便管理还可以将准备室进行适当的分区,如划分为药瓶 储藏室,洗涤室,培养基配制室及灭菌室等。 ⑴ 药品储藏室 主要用于存放各种化学药品, 要求室内干燥、 通风、 避光、 应配制、 备药品柜、冰箱等。各类化学试剂应按要求分类存放,需要低温保存 的药剂应置于冰箱内保存,有毒药品应按规定存放和管理。 ⑵ 洗涤室 用于玻璃器皿、用具及实验用具的洗涤、干燥和存放;;培养材料的 预处理与清洗 :组培苗的出瓶、清洗与整理等。要求有电源、自来 水和水槽,上下水道畅通,排水良好,地面☆△◆▲■耐湿、防滑,便于清洁。 应配备工作台、烘箱、晒瓶架、周转筐、毛刷等。 (3)培养基配制室 用于培养基的配制,还可以分为称重分室和配制分室。药品称量需 配制各种规格的天平,包括普通天平和分析天平。培养基配制需要配 备工作台、蒸馏水器、电炉(电饭锅或微波炉)、水浴锅、磁力搅拌 器、过滤装置、酸度计、分注器、各种试管、三角瓶、烧杯、量筒、 吸管、移液管及移液管架以及贮藏母液的冰箱、移动式载物台(医用 小推车)、周转筐等。 (4)灭菌室 用于培养基、器皿、用具、及其它物品的灭菌。灭菌室根据工作量的 大小决定其面积的大小, 一般控制在 30~50 ㎡。 要求、 通风、 明亮, 墙壁和地面应防潮、耐高温。应配置高压电源和排水设施、高压蒸汽 灭菌装置、干热消毒柜或烘箱、细菌过滤装置及移动式载物台、周转 筐等。 准备室也可设计成大的通间,使试验操作的各个环节 在同一房间按程序完成,以便于程序化操作与管理,从而提高工作效 率。此外还便于培养基的配制、分装和灭菌的自动化操作程序设计, 从而减少规模化生产的人工劳动,更便于无菌操作体系的建立。 ②无菌操作室(接种室) 无菌操作室也叫接种室,主要用于植物材料的消毒、接种、培 养 物的继代转接等无菌操作。由于植物组织培养时间较长,尤其需要防 止细菌、真菌污染。因此,接种室内无菌条件控制的好坏直接影响培 养物的污染率及接种工作效率等重要指标。 接种室面积根据需要和环 境控制的难易程度而定, 在工作方面的前提下易小不宜大。 室内地面、 墙面、天花◆■板应采用★-●=•▽防水或耐腐蚀材料,符合无尘积累要求,易于清 洁和消毒;门窗要求密闭性好,一般用滑动门窗,不能安装▲★-●风扇,通 风换气需通过空气调节装置进行。 无菌室内安装紫外灯, 每周照射 1~ 2h,每次使用前照射 10~30min;定期用甲醛和高锰酸钾(或用臭氧 发生器)熏蒸消毒。接种室内应配备超净工作台、灭菌器或酒精灯、 酒精瓶及酒精棉球、接种工具、器械支架及移动式载物台。 接种室外还应设置预备室作为缓冲间,一方面可供操作人员更换 工作服、工作帽、拖鞋及器皿准备、培养材料处理等,另一方面可减 少工作人员将外界尘埃、杂菌等污染物直接带入接种室内。缓冲间与 接种室之间最好安装塑钢玻璃及滑动门,以便于观察;而且缓冲间与 接种室的门应该错开,也不得同时开启,以防止在工作人员进出时空 气对流带入杂菌。缓冲间内应配备鞋架和衣帽挂钩,并备有清洁的工 作服、工作帽、口罩及拖鞋;墙顶应安装 1~2 盏紫外灯,定时照射杀 菌。 ③培养室: 用于对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件下的培 养。培养室内放置培养架,方便操作,.并充分利用空间。培养室的 大小可根据生产规模和培养架的大小、数目及其他附属设备而定,其 设计以充分利用空间和节省能源为原则。可采取多室设计方式,每个 培养是面积不宜过大,约 10~20 ㎡,以满足不同培养材料对环境条 件控制的不同要求,也便于对同室内环境条件的均匀控制。室内天花 板和内墙最好用塑钢板或瓷砖装修,地面铺设水模式或瓷砖,以保持 室内明亮、平整,并方便清洁和消毒;室内还要安装紫外灯,定时进 行杀菌处理。培养室内需要安装空调,以控制室内温度,一般要求保 持在 20~27℃之间,低于 15℃或高于 35℃对植物的生长不利。培养 室的光源一般使用白色日光灯,光周期可采用自动定时器来控制,光 照强度一般控制为 1000~6000lx,每天光照时间薇 10~16h。需要大 量的暗培养时可以增设暗培养室,或使用暗箱◇•■★▼培养。培养室内的相对 湿度保持在 70%~80%为宜。湿度过高,容易使培养及污染;湿度 过低,容易使培养基失水变硬,影响培养物生长。在梅雨季节可使用 除湿机人工除湿,干燥季节可利用加湿器来增加湿度,也可采取防治 水盆的方法来调节湿度。 ④温室 组培试管苗在进入大田栽培之前,必须经过一段时间的炼苗,即驯化 移栽过程,使其逐渐适应自然条件。北方(长江以北)通常建造日光 温室,而南方通常建造连栋温室大棚进行试管苗得分驯化移栽。 ⑴日光温室:日光温室又称为钢拱式日光温室、节能温室,主要利用 太阳能做热源提供◆◁•室内温度。这种温室跨度为 5~7 米,中高 2.4~3.0 米,后墙用砖砌成,厚 50~80 厘米,高 1.6~2.0 米。钢筋骨架,拱架 为单片桁架, 上弦为∮14~∮16,的圆钢, 下弦为∮12~∮14∮,的圆钢, 中间用∮8~∮10 的钢筋做拉花,宽 15~20 厘米,拱架上端搭在中柱 上,下端固定在前端预埋水泥基础上。拱架间用三道单片桁架花梁横 向拉接,以使整个骨架成为一体。温室后屋面可铺泡沫塑料板和水泥 板,抹草泥封盖防寒,后墙没隔 4~5 米设通风口。 此种温室坚固耐用, 采光和通风性好, 操作方便, 适于北方地区使用, 能充分利用太阳能,降低生产成本。 ⑵智能连栋式温室: 智能连栋式温室有屋脊形连栋温室和拱圆形连栋 温室等类型, 是由相等的双屋面借纵向侧柱相互连通, 可以连续搭接, 形成室内串通的大型温室。此类温室又被称为现代化温室,每栋可达 数千或上万平方米,框架采用镀锌钢材,屋面用铝合金材料做桁条, 覆盖物可采用玻璃、 玻璃钢、 塑料板材或者塑料薄膜, 冬季通过热水、 蒸汽或者热风加温,夏季采用通风与遮阳相互结合的方法降温。整栋 温室的加温、通风遮阳和降温工作可全部或部分计算机控制。 3.高压灭菌锅、超净工作台等都是组培室必不可少的仪器和设备,只 有科学正确的学会它们的使用方法,才能确保组培的成功。 三、 主要材料、仪器、试剂 材料:各种植物材料 仪器:⑴分析天平 ①介绍: 精确度达 0.0001g,用于称量微量元素、植物生长调节剂和 一些高精确度的试验品。电子天平一般采用应变式传感器、电容式传 感器、电磁平衡式传感器。应变式传感器,结构简单、造价低,但精 度有限。 在 2009 年前不能做到很高精度;电容式传感器称量速度快,性价 比较高,但也不能达到很高精度;采用电磁平衡传感器的电子天平。 其特点是称量准确可靠、显示快速清晰并且具有自动检测系统、简便 的自动校准装置以及超载保护等装置。 厂家:上海奔普仪器科技有限公司 价格:6500 元 ②使用方法: 1、 将天平置于稳定的工作台上避免振动、气流及阳光照射。 2、 在使用前调整水平仪气泡至中间位置。 3、 电子天平应按说明书的要求进行预热。 4、 称量易挥发和具有腐蚀性的物品时,要盛放在密闭的容器中,以 免腐蚀和损坏电子天平。 5、 经常对电子天平进行自校或定期外校,保证其处于最佳状态。 6、 如果电子天平出现故障应及时检修,不可带“病”工作。 7、 操作天平不可过载使用以免损坏天平。 8、 若长期不用电子天平时应暂时收藏为好。 ③注意事项: 一、 电子天平的心脏一重力电磁传感器簧片(一般共有六一八片〕 细而薄,极易受损,且天平的精度越高,其重力传感簧片也越薄,所 以在使用中应特别注意加以保护, 不要向天平上加载重量超过其称量 范围的物体,绝不能用手压称盘或使天平跌落地下,以免损坏 天平 或使重力传感器的性能发生变化, 另外称量一个物体以特别是较重的 物体〕 一般不要超过 30 秒钟搬动和运输时应将称盘及其托盘取下来。 二、 电子天平实际上是测量地球对敞在称盘上的物体的引力即重力 的仪器, 而由于地球径纬度的不同, 各地的重力加速度 (9-9. 8m2/s〕 并不相同,在使用当地其称量准确度取决于是否进行了正确的校正和 校正砧码的精度,假如您发现在广州经校正好的天平,在当地称重有 一定误差, 这并不表示天平有任何故障请按各型号电子天平说明书介 绍的方法用计量部门认可的标准砧码进行校正即可进行准确称量。 三、电子天平的校正机构一般分三大类: 全自动校正:内合标准砧码和电机伺服机构,只需按一个功能键即 可在数十秒钟内完成校正, 一般新型的万分之一克精度以上的电子天 平均采用全自动校正机构; 半自动校正:内装标准砧码但无伺服机构,在进入校正程序后,需 要手动加载和卸下校正码; 手动校正: 天平内没有标准砧码和伺服机构需要手动进入校正程序 并外加标准砧码进行校正一般精度较低的天平采用手动校正 四、电子天平是一台对环境高度敏感的精密电子测量仪器,使用时应 小心操作,安装台面应无明显振动,不要□◁敞在空调口,若这些条件不 能满足, 应采取一些改进措施如变更使用地点装上防风墨等同时注意 要调整底角螺丝使水平指示器的气泡居中。 天平未调好水平也是产生 称量误差的原因之一。 ⑵粗天平: ①介绍:精确度达 0.01g 和 0.1g,用于称量大量元素、琼脂、糖等 用量较大的药品。 厂家:北京信康亿达公司 价格:1680 元 ②使用方法: 1.要放置在水平的地方。游码要归零。 2.调节平衡螺母(天平两端的螺母)调节零点直至指针对准中央刻度 线.左托盘放称量物,右托盘放砝码(左物右码)。根据称量物的性状 应放在玻璃器皿或洁净的纸上, 事先应在同一天平上称得玻璃器皿或 纸片的质量,然后称量待称物质。 4.添加砝码从估计称量物的最大值加起,逐步减小。托盘天平只能称 准到 0.1 克。加减砝码并移动标尺上的游码,直至指针再次对准中央 刻度线.过冷过热的物体不可放在天平上称量。 应先在干燥器内放置至室温 后再称(或在特殊器皿中称量)。 6.物体的质量 =砝码重量+游码所显示的度数 7.取用砝码必须用镊子轻拿轻放,取下的砝码应放在砝码盒中,称量 完毕,应把游码移回零点。 8.称量干燥的固体药品时,应在两个托盘上各放一张相同质量的纸, 然后把药品放在纸上称量。 9.易潮解的药品,必须放在玻璃器皿上(如:小烧杯、表面皿)里称 量。 10.砝码若生锈,测量结果偏小;砝码若磨损,测量结果偏大。 ⑶高压灭菌锅 ①介绍:高压灭菌锅又名高压蒸汽灭菌锅,可分为手提式灭菌锅和立 式高压灭菌锅。利用电热丝加热水产生蒸汽,并能维持一定压力的装 置。主要有一个可以密封的桶体,压力表,排气阀,安全阀,电热丝 等组成。安全阀:超过额定压力,释放压力;手 轮:旋转罗盘式开 启盖门,简单方便(适合于 40 升以上产品);压力表:指示压力显 示;密封圈:自涨式密封圈;底部活动轮;蒸汽收集瓶:3L,聚乙烯 材质(适合于内排式和带干燥型)具备产品医疗器械注册证,每台经 过技术监督局严格检测(每台设备配一套检测证书)。 厂家:创博环球〔北京〕生物科技有限公司 价格:8000 元 ②使用方法: 1.在外层锅内加适量的水,将需要灭菌的物品放入内层锅,盖好锅盖 并对称地扭紧螺旋。 2.加热使锅内产生蒸气,当压力表指针达到 33.78kPa 时,打开排气 阀,将冷空气排出,此时压力表指针下降,当指针下降至零时,即将 排气阀关好。 3.继续加热,锅内蒸气增加,压力表指针又上升,当锅内压力增加到 所需压力时,将火力减小,按所灭菌物品的特点,使蒸气压力维持所 需压力一定时间,然后将灭菌器断◇=△▲电或断火,让其自然冷后再慢慢打 开排气阀以排除余气,然后才能开盖取物 ③注意事项 1. 待灭菌的物品放置不宜过紧; 2.必须将冷空气充分排除,否则锅内温度达不到规定温度,影响灭菌 效果; 3.灭菌完毕后,不可放气减压,否则瓶内液体会剧烈沸腾,冲掉瓶塞 而外溢甚至导致容器爆裂。 须待灭菌器内压力降至与大气压相等后才 可开盖; 4.已有微电脑自动控制的高压灭菌锅,只需放去冷气后,仪器即可自 动恒压定时,时间一到则自动切断电源并鸣笛,使用起来很方便。 ⑷超净工作台 ①介绍:超净工作台(clean bench)是为了适应现代化工业、光电产 业、 生物制药以及科研试验等领域对局部工作区域洁净度的需求而设 计的。超净工作台原理是在在特定的空间内,室内空气经预过滤器初 滤,由小型离心风机压入静压箱,再经空气高效过滤器二级过滤,从 空气高效过滤器出风面吹出的洁净气流具有一定的和均匀的断面风 速,可以排除工作区原来的空气,将尘埃颗粒和生物颗粒带走,以形 成无菌的高洁净的工作环境。 厂家:上海乔跃电子有限公司 价格:9800 元 ②使用方法: 超净台的优点是操作方便自如, 比较舒适, 工作效率 , 预备时间短,开机 10 分钟以上即可操作,基本上可随时使用。在工 厂化生产中,接种工作量很大,需 经常长久地工作时,超净台是很 理想的设备。超净台由三相电机作鼓风动力,功率 145~260W 左右, 将空气通过由特 的微孔泡沫塑料片层叠合组 的“超级滤清器”后 吹送出来,形成连★◇▽▼•续不断的无尘无菌的超净空气层流,即所谓“ 有 效的特殊空气”,它除去了大于 0.3μ m 的尘埃、真菌和细菌孢子等 等。超净空气的流速为 24~30m/min,这已足够防止附近空气可能袭 扰而引起的污染, 这样的流速也不会妨碍采用酒精灯或本生灯对器械 等的灼烧消毒。工作人员就在这样的无菌条件下操作,保持无菌材料 在转移接种过 中不受污染。但是万一操作中途遇到停电,暴露在未 过滤空气中的材料便难以幸免污染。这时应迅速结束工作,并在瓶上 作出记号,内中的材料如处 增殖阶段,则以后不再用作增殖而转入 生根培养。 如为一般性生产材料, 极其丰富也可弃去。 如处 生根过 , 则可留待以后种植用。 ③注意事项: 超净台电源多采用三相四线 ,其中有一零线,连通机器外壳,应 接牢在地线上,另外三线都是相线V。三线接入电 路中有一定的顺序,如线头接错了,风机会反转,这时声音正常或稍 不正常,超净台正面无风(可用酒精灯火焰观察动静,不宜久试), 应及时△▪▲□△切断电源,只将其中任何两相的线头交换一下位置再接上,就 可解决。三相线如只接入两相,或三相中有一相接触不良,则机器声 音很不正常,应立即切断电源仔细检修,否则会烧毁电机。这些常识 应在开始使用超净台时就向工作人员讲解清楚, 免除不应造成事故与 损失。 超净台进风口在背面或正面的下方, 金属网罩内有一普通泡沫塑料 片或无纺布,用以阻拦大颗粒尘埃,应常检查、拆洗,如发泡沫塑料 老化,及时更换。除进风口以外,如有漏气孔隙,应当堵严,如贴胶 布,塞棉花,贴胶水纸等。工作台正面的金属网罩内是超级滤清器, 超级滤清器也可更换,如使用年久,尘粒堵塞,风速减小,不能保证 无菌操作时,则可换上新的。 超净台使用寿命的长短与空气的洁净度有。 在温带地区超净台可在 一般实验室使用, 然而在热带或亚热带地区, 由大气中含有量的花粉, 或多粉尘的地区,超净台则宜放在较好的有双道门的室内使用。任何 情下不应将超净台的进风罩对着开敞的门或窗, 以免影响滤清器的使 用寿命。 无菌室应定期用 70%酒精或 0.5%苯酚喷雾降尘和消毒,用 2%新洁 尔灭抹拭台面和用具(70%酒精也可),用福尔马林(40%•☆■▲甲醛)加少 量钾定期密闭熏蒸,配合紫外线 分钟以上)等 等消毒灭菌手段,以使无菌室经常保持度的无菌状。接种箱内部也应 装有紫外线 分钟以上照射灭菌,但凡是照射不到 之处仍是有菌的。在紫外线灯开启时间较长时,可激发空气中的氧分 子缔合成臭氧分子,这种气分有很强的杀菌作用,可以对紫外线没有 直接照到的角落产生灭菌效果。由于臭氧有碍健康,在进入操作之前 应先掉紫外线灯,后十多分钟即可入内。 在超净工作台上亦可吊装紫外线灯,但应装在照明灯罩之外,并错开 照明灯的排列,这样在工作时不妨碍照明。若将紫外线灯装入照明灯 罩(玻璃板)里面,这是毫无用处的,为紫外线不能穿透玻璃,它的 灯管是石英玻璃,而不是硅酸盐玻璃的。 接种室内力求简洁, 凡与本室工作无直接关系的物品一律不能放入, 以保持无菌状。接种室内的空气与外界空气应绝对隔绝,预留的通气 孔道应尽量密闭。通气孔道可设上下气窗,气窗面积宜稍大,需覆上 4 层纱布作简单滤尘。在一天工作之后,可开窗充分换气,然后再予 以密闭。总之,既清洁无尘无菌,又空气新鲜,适宜工作。覆在通气 窗上的纱布应经常换洗。但是上述种种措施只是理想的设计方案,往 往不易全面做到,其实只严格无菌操作手续,在门窗敞开的室内,有 一超净台的保护,接种的污染率仍可控在生产上可以容忍的水准。 ⑸酸度计 ①介绍:是一种常用的仪器设备,主要用来精密测量液体介质的酸碱 度值,配上相应的离子选择电极也可以测量离子电极电位 MV 值,pH 计被广泛应用于环保、污水处●理、科研、制药、发酵、化工、养殖、 自来水等领域。该仪器也是食品厂、饮用水厂办 QS、HACCP 认证中的 必备检验设备。 厂家:青岛得加利电子有限公司 价格:2480 元 ②使用方法: 1、校正:先将仪器斜率调节器调节在 100%位置,再根据被测溶液的 温度,调节温度调节器到该温度值。 2、定位:把复合电极插入仪器。选择一种最接近样品 pH 值的缓冲溶 液,把电极放入这一缓冲溶液里,摇动烧杯,使溶液均匀。待读数稳 定后,该读数应是缓冲溶液的 pH 值, 3、测量:经过 pH 标定的仪器,即可用来测定样品的 pH 值。用蒸馏 水清洗电极,用滤纸吸干电极球部后,把电极插在盛有被测样品的烧 杯内,轻轻摇动烧杯,待读数稳定后,就显示被测样品的 pH 值。测 量完毕套上保护帽,帽内放少量补充液(3mol/L 的氯化钾溶液), 保持电极球泡湿润。 试剂:各种大量元素、植物生长调节剂、各种有机物质。 四、实验步骤 1.在教室的带领下,参观学校植物组织培养实验室,并设计出植物组 织培养实验室的组成。 2.完成植物组织培养实验室常见仪器的使用方法。 3.培养瓶和相关用具的清洗准备。 4.植物材料的准备。 五、试验讨论及思考题解答 1.请绘制出植物组织培养实验室的结构示意图, 并说明各分室的结构 及功能。 ①药品储藏室:主要用于存放各种化学药品,要求室内干燥、通风、 避光、 应配◁☆●•○△制、 备药品柜、 冰箱等。 各类化学试剂应▲●…△按要求分类存放, 需要低温保存的药剂应置于冰箱内保存, 有毒药品应按规定存放和管 理。 ②洗涤室:用于玻璃器皿、用具及实验用具的洗涤、干燥和存放;; 培养材料的预处理与清洗 :组培苗的出瓶、清洗与整理等。要求有 电源、自来水和水槽,上下水道畅通,排水良好,地面耐湿、防滑, 便于清洁。应配备工作台、烘箱、晒瓶架、周转筐、毛刷等。 培养基配制室: 用于培养基的配制, 还可以分为称重分室和配制分室。 药品称量需配制各种规格的天平,包括▽•●◆普通天平和分析天平。培养基 配制需要配备工作台、 蒸馏水器、 电炉 (电饭锅或微波炉) 、 水浴锅、 磁力搅拌器、 过滤装置、 酸度计、 分注器、 各种试管、 三角瓶、 烧杯、 量筒、吸管、移液管及移液管架以及贮藏母液的冰箱、移动式载物台 (医用小推车)、周转筐等。 ③灭菌室:用于培养基、器皿、用具、及其它物品的灭菌。灭菌室根 据工作量的大小决定其面积的大小,一般控制在 30~50 ㎡。要求、 通风、明亮,墙壁★▽…◇和地面应防潮、耐高温。应配置高压电源和排水设 施、高压蒸汽灭菌装置、干热消毒柜或烘箱、细菌过滤装置及移动式 载物台、周转筐等。 ④培养室: 用于对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条 件下的培养。培养室内放置培养架,方便操作,.并充分利用空间。 培养室的大小可根据生产规模和培养架的大小、 数目及其他附属设备 而定,其设计以充分利用空间和节省能源为原则。可采取多室设计方 式,每个培养是面积不宜过大,约 10~20 ㎡,以满足不同培养材料 对环境条件控制的不同要求,也便于对同室内环境条件的均匀控制。 室内天花板和内墙最好用塑钢板或瓷砖装修, 地面铺设水模式或瓷砖, 以保持室内明亮、平整,并方便清洁和消毒;室内还要安装紫外灯, 定时进行杀菌处理。培养室内需要安装空调,以控制室内温度,一般 要求保持在 20~27℃之○▲-•■□间, 低于 15℃或高于 35℃对植物的生长不利。 培养室的光源一般使用白色日光灯, 光周期可采用自动定时器来控制, 光照强度一般控制为 1000~6000lx,每天光照时间薇 10~16h。需要 大量的暗培养时可以增设暗培养室,或使用暗箱培养。培养室内的相 对湿度保持在 70%~80%为宜。湿度过高,容易使培养及污染;湿 度过低,容易使培养基失水变硬,影响培养物生长。在梅雨季节可使 用除湿机人工除湿,干燥季节可利用加湿器来增加湿度,也可采取防 治水盆的方法来调节湿度。 2.请详细说明高压灭菌锅、超净工作台的操作要点。 答:⑴高压灭菌锅的操作要点:首先,检查锅内蒸馏水量是否充 足,第二,检查个个阀门及开关是否工作正常。第三,将待△▪▲□△灭菌的物 品用一层牛皮纸或两层报纸包好,一定要▷•●包完整!放入锅内,物与物 之间一定要有空隙。第四,盖好锅盖,螺母对称拧紧,打开放气阀, 关闭安全阀。第五,打开电源观察放气阀是否有蒸汽流出,确定后关 闭放气阀,待压力表到达 0.1-0.15kpa(温度 121℃左右)时计时, 15-30 分钟,关闭开关。第六,待压力表指针归零后,打开放气阀, 按对称方式打开锅盖,取出物品。注意事项:1.锅内水必须用蒸馏水 或纯化水。2.锅盖螺母必须对称拧紧。3.一定要在放气阀出大量蒸汽 在关闭。4.当灭菌时间结束时,必须等到压力表归零在打开。5.灭菌 锅超过最大耐受压力后,放气阀会自动弹开,此时锅内物品不能保证 灭菌完全,需从新灭菌。 ⑵超净公作台的操作要点:①接通电源。将电源插入插座,并打开整 个超净工作台的总开关后,可以看到按钮面板个电源指示灯亮,表示 电源处于接通状态。(通常,实验室的超净工作台总电源开关一直是 处于打开状态)。②清理台面,拉下防尘玻璃挡板,紫外杀菌。若超 净工作台内堆放有与本实验无关的物品,可先移出,用酒精棉球清洁 台面后可预先放入实验相关的且能以紫外照射的材料进行紫外灭菌。 拉下工作台前面的玻璃挡板, 并关严。 找到按键板, 按下标有“杀菌” 字样的按钮即可开启紫外灯管 (再次按下该按钮则会闭紫外灯 )进行 杀菌,一般照射 30min 即可。 【注意】可将操作台面大致分为废物回 收区、物品放置区和操作区。操作区内尽量不要堆放物品;不要在杀 菌的同时开启风机。③开启风机和照明系统,开始实验。紫外杀菌结 束前应先开启风机,再关闭紫外灯,最后掀起玻璃挡板开始实验。按 钮板面上面标记“开启/停止”字样的按钮是风机的开启和关闭的按 钮。正常情况下,风机的最低档在出厂时候已经满足风速要求。使用 时可多次按下“风量调节”按钮选择需要的风速大小。 按动风量调节 按钮后,风速的变化为:“低→高→低”的不断循环,并且有相应的 灯指示风量状态。 标有“照明”字样的按钮是超净工作台内照明灯的 开关,可根据需要开启。 【注意】1.试验操作时候尽量避免快速且大 幅度移动,以减少对超净工作台内气流的扰乱,避免外界细菌进入。 2.有的超净台同时具有正压和负压系统,一般情况下使用正压系统; 当试验的试剂可能有气体逸出,对人员造成刺激性伤害时候,可使用 负压风道系统,使所有的气体只在超净台内部循环。④结束试验,清 理台面, 关闭风机, 拉下防尘玻璃挡板。 试验后, 清理台面废弃物后, 用酒精棉球擦拭台面。关闭风机后拉下防尘玻璃挡板。若下面还有试 验,可打开紫外灯,为接下来再次使用做好准备。

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